miRNA-661及其抑制剂在抗肝癌中的应用的制作方法

本发明涉及生物医药。具体涉及mirna-661及其抑制剂在抗肝癌中的应用。

背景技术：

1、肝细胞癌(简称肝癌)是一种高发的恶性肿瘤，死亡率位居恶性肿瘤第四位，且肝癌发展进程快，机制复杂，对化疗不敏感，预后差，五年生存率仅仅为18％，寻找肝癌的特异性靶标，是肝癌治疗亟待解决的问题。

2、microrna(mirna)作为一类微小非编码rna，长度约为18～25个碱基。在肿瘤学的分子研究中，mirna的研究逐渐成为焦点，目前，已有许多mirnas可以特异地调节与癌症相关的重要基因，起到调癌基因或抑癌基因的作用，同时由于其分子结构小、易导入细胞、合成成本低等原因，mirna被认为是临床肿瘤靶向治疗的合适选择。mirna在肝癌预防中，能够调控肝癌发生和发展的许多环节中，包括有emt、癌转移及癌干细胞，到目前为止，mirna-661尚无在肝癌治疗中的临床应用。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种mirna-661及其抑制剂在抗肝癌中的应用。mirna-661抑制剂能够有效抑制肝癌的侵袭和迁移能力，具有明显的抗肝癌作用。同时检测肝癌中mirna-661的表达量、能够预测肝癌的转移能力，在抗肝癌方面具有潜在的应用价值。本发明是通过以下技术方案实现的：

2、本发明提供了mirna-661抑制剂在制备抗肝癌药物中的应用，所述mirna抑制剂的生物活性片段可以为但不限于mirna-661的核苷酸序列的重组质粒载体或者重组病毒载体；

3、所述mirna-661的核苷酸碱基序列如seq id no.1所示，所述mirna-661抑制剂的核苷酸碱基序列如seq id no.2所示。

4、进一步地，所述mirna抑制剂的生物活性片段为mirna-661的核苷酸序列的重组质粒载体或者重组病毒载体。

5、进一步地，检测mirna-661表达水平的探针具有如seq id no.3所示的核苷酸碱基序列。

6、本发明还提供了一种抗肝癌用小分子药物，所述的小分子药物包括上述的mirna-661抑制剂的生物活性片段。

7、进一步地，所述小分子药物包括医学上可接受的小分子化合物、载剂或/和辅料；

8、所述小分子化合物、载剂及辅料可以为但不限于壳聚糖、胆固醇、脂质体、环糊精和微囊中的一种或几种。

9、进一步地，所述小分子药物的给药方式包括口服给药或/和注射给药；所述的注射给药方式可以为但不限于静脉注射、肌肉注射或瘤内注射。

10、本发明还提供了一种用于评估肝癌恶性程度的试剂盒，所述试剂盒包括特异性检测上述mirna-661的表达水平的引物，所述的引物包括逆转录引物、上游引物和下游引物；

11、优选的，所述逆转录引物的序列如seq id no.3所示，所述上游引物的序列如seqid no.4所示，所述下游引物的序列如seq id no.5所示。

12、本发明具有以下积极有益效果：

13、mirna-661抑制剂能明显在体内外抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。过表达mirna-661后，肝癌细胞的侵袭和迁移明显增加，而转染mirna-661抑制剂可以抑制肝癌细胞的恶性表型。因此，本发明提供的mirna抑制剂能够制备抗肝癌药物，提高肝癌恶性进展期肿瘤的临床治疗效果，具有良好的临床开发及应用价值。

14、肝癌细胞系检测表明，mirna-661在肝癌细胞的表达显著高于正常细胞，且mirna过表达后可以增加肝癌细胞的侵袭和迁移能力。对于研究以mirna-661为靶点，抑制肿瘤细胞恶性表型和调控肝癌的转移具有重要的科研参考价值及应用价值。

技术特征：

1.mirna-661抑制剂在制备抗肝癌药物中的应用，其特征在于，所述mirna抑制剂的生物活性片段可以为但不限于mirna-661的核苷酸序列的重组质粒载体或者重组病毒载体；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述mirna抑制剂的生物活性片段为mirna-661的核苷酸序列的重组质粒载体或者重组病毒载体。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，检测mirna-661表达水平的探针具有如seq id no.3所示的核苷酸碱基序列。

4.一种抗肝癌用小分子药物，其特征在于，所述的小分子药物包括权利要求1所述的mirna-661抑制剂的生物活性片段。

5.根据权利要求4所述的小分子药物，其特征在于，所述小分子药物包括医学上可接受的小分子化合物、载剂或/和辅料；

6.根据权利要求4或5所述的小分子药物，其特征在于，所述小分子药物的给药方式包括口服给药或/和注射给药；所述的注射给药方式可以为但不限于静脉注射、肌肉注射或瘤内注射。

7.一种用于评估肝癌恶性程度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括特异性检测权利要求1-3任一项所述mirna-661表达水平的引物，所述的引物包括逆转录引物、上游引物和下游引物；

技术总结
本发明公开了一种miRNA‑661及其抑制剂在抗肝癌中的应用。miRNA‑661抑制剂及其制备的抗癌药物能够有效抑制肝癌的侵袭和迁移能力，具有明显的抗肝癌作用。同时检测肝癌中miRNA‑661的表达量能够预测肝癌的转移能力，在抗肝癌方面具有潜在的应用价值。

技术研发人员：张国强,马海洁,王婕,吴逸昕
受保护的技术使用者：舟山医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/21