一种贝莱斯芽孢杆菌DG20及其用途的制作方法

本发明涉及微生物，特别是涉及一种贝莱斯芽孢杆菌dg20及其用途。

背景技术：

1、大豆根腐病是大豆生产中的首要土传病害，其发生分布广、危害重、传播快、病原种类复杂，是世界的、较难防治的一种病害，也是大豆苗期危害比较严重的常发性病害，田间发病较轻时，产量降低20％-30％，发病较重时，产量降低60％-80％，甚至绝产。目前，对其防治主要是使用化学农药，通常在短时间内能有效抑制病原菌，但由于病原菌生理小种的变化和耐药性的增强，不断增加农药剂量，则会导致更为严重的病害爆发，造成土壤污染、环境污染、农药残留、食品安全等问题，而导致了化学药剂对大豆病害的防治一直不理想。因此，在可持续农业模式需求的背景下，探讨防控的新策略具有重要意义。

2、近年来，根际微生物在病害防控中的抗病作用愈加凸显，尤其是土传病害的防治中收到诸多学者的关注，在过去几十年对于生防菌株的研究显著增加，有益的根际细菌和真菌的生防效果已经得到充分的探究。很多学者认为，对植物土传病害的抑制在一定程度上是土壤根际微生物的作用，根际生防微生物通过竞争、溶菌、生理生化、诱导植物系统抗性等方式抑制病害，改善根际土壤微环境，促进植物健康生长。许多在病害防控中有益的根际微生物可通过培养法获得，例如郭荣君等利用枯草芽孢杆菌制作固体菌剂可使大豆根腐病防效高达74.6％；杨可欣等分离出大豆根腐病生防菌芽孢杆菌8-32不仅可增加土壤酶活性，还可提高土壤中的生物量；李旭等分离出的枯草芽孢杆菌防效可达53.6％，且可使大豆增产12.5％。

3、因此对于大豆根腐病生防菌的筛选鉴定及防效检测，可为具有更好防效的菌剂研发提供优质菌源，为生防机理的研究鉴定基础。

技术实现思路

1、本发明目的是针对大豆根腐病发生分布广、危害重、传播快，化学防治易造成病原菌抗药性严重，化学药剂污染环境和对食品安全造成威胁等，利用根际微生物拮抗菌，从玉米大豆带状复合种植中大豆根际筛选鉴定一株大豆根腐病生防菌株-莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)dg20，其抑菌效果好，促进大豆生长，可有效提高大豆根腐病的防治效果。

2、本发明的一方面提供了一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)dg20，所述贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)dg20的保藏号为cgmcc no:29058。

3、本发明的芽孢杆菌菌株于2023年8月送交江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所植保研究中心微生物实验室进行形态特征鉴定，鉴定结果为：

4、形态特征为：dg20在固体培养基上的菌落形态为白色，圆形，不透明，易挑起。

5、经形态学鉴定和16s rrna扩增序列发育树分析，确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌，按照国际命名规则：属名+种名+株名对该菌株进行命名，命名为莱斯芽孢杆菌dg20，保藏号为：cgmcc no:29058。本发明分离的cgmcc no:29058菌株的核苷酸序列如seq id no.1所示。

6、本发明的莱斯芽孢杆菌dg2已于2023年11月15日中国普通微生物菌种保藏管理中心注册保藏，保藏号为cgmcc no:29058。

7、本发明的一方面提供了贝莱斯芽孢杆菌dg20用于促进大豆生长的用途。

8、本发明的一方面提供了贝莱斯芽孢杆菌dg20或者其无菌滤液用于防治大豆根腐病的用途。

9、本发明的一方面提供了贝莱斯芽孢杆菌dg20用于抑制大豆根腐病致病菌镰刀菌的用途。

10、本发明的一方面提供了贝莱斯芽孢杆菌dg20无菌滤液用于抑制大豆根腐病致病菌镰刀菌的用途。

11、本发明的一方面提供了一种用于促进大豆生长的制剂，所述制剂的主要有效成分为贝莱斯芽孢杆菌dg20。

12、本发明的一方面提供了一种用于防治大豆根腐病的制剂，所述制剂的主要有效成分为贝莱斯芽孢杆菌dg20。

13、本发明的一方面提供了一种防治大豆根腐病的制剂，所述制剂的主要有效成分为贝莱斯芽孢杆菌dg20无菌滤液。

14、本发明一方面提供了一种大豆根腐病致病菌镰刀菌的抑制剂，所述抑制剂的主要有效成分为莱斯芽孢杆菌dg20或者莱斯芽孢杆菌dg20无菌滤液。

15、如上所述，本发明的贝莱斯芽孢杆菌，具有以下有益效果：

16、本发明筛选的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)dg20具有显著促进大豆幼苗的生长和防治大豆根腐病的功能，对大豆根腐病致病镰刀菌有抑制作用，平板对峙抑制率为83.33％，无菌滤液菌丝生长抑制率为62.15，盆栽防效为65.38％。本发明为农业促生防病的微生物菌剂和肥料提供支撑。

17、本发明菌株保藏信息如下：

18、菌株名称：贝莱斯芽孢杆菌dg20

19、保藏号为：cgmcc no:29058；

20、保藏日期：2023年11月17日；

21、保藏单位名称：中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心；

22、保藏单位简称：cgmcc；

23、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

技术特征：

1.一种贝莱斯芽孢杆菌dg20，所述贝莱斯芽孢杆菌dg20的保藏号为cgmcc no:29058，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。

2.根据权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌dg20核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20用于促进大豆生长的用途。

4.如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20或者其无菌滤液用于防治大豆根腐病的用途。

5.如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20或者其无菌滤液用于抑制大豆根腐病致病菌镰刀菌的用途。

6.一种用于促进大豆生长的制剂，其特征在于，所述制剂的主要有效成分为如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20。

7.一种用于防治大豆根腐病的制剂，其特征在于，所述制剂的主要有效成分为如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20或者其无菌滤液。

8.一种大豆根腐病致病菌镰刀菌的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂的主要有效成分为如权利要求1或者2所述的贝莱斯芽孢杆菌dg20或者其无菌滤液。

技术总结
本发明提供一种贝莱斯芽孢杆菌DG20及其用途。该菌株具有显著促进大豆幼苗的生长和防治大豆根腐病的功能，对大豆根腐病致病镰刀菌有抑制作用。

技术研发人员：陈亚丽,钱新,李美霞,巨亚雯,周长勇,付佑胜,曹凯歌
受保护的技术使用者：江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/3/17