蚯蚓干燥粉末制造方法

蚯蚓干燥粉末制造方法
【专利摘要】本发明提供一种蚯蚓干燥粉末的制造方法，其不仅没有蚯蚓的酶活性下降之虞，而且可以使所得到的蚯蚓干燥粉末的酶活性增大。在将经粪土去除处理的蚯蚓作为原料制造蚯蚓干燥粉末的蚯蚓干燥粉末制造方法中，对经粪土去除处理的蚯蚓的活体或其粉碎物进行在10～500MPa的压力条件且0～70℃的温度条件下的加压处理，并将该加压处理后的蚯蚓或其粉碎物作为蚯蚓干燥粉末的原料。
【专利说明】蚯蚓干燥粉末制造方法

【技术领域】
[0001]本发明涉及一种将经粪土去除处理的蚯蚓作为原料制造蚯蚓干燥粉末的蚯蚓干燥粉末制造方法。

【背景技术】
[0002]成为作为保健食品和药剂使用的蚯蚓干燥粉末的原料的蚯蚓是在由泥土构成的养殖床上，除泥土以外另将牛粪和食品废弃物等作为饵料进行供给来养殖的。通常，泥土中繁殖着大肠杆菌和一般细菌，另外，还包含不少砷和重金属等有害物质，并且，向蚯蚓供给的饵料中也包含不少砷和重金属等有害物质。因此，蚯蚓通过在其培育过程中吞食泥土和饵料而在体内逐渐积蓄细菌和有害物质。因此，在制造蚯蚓干燥粉末时，需要从蚯蚓中去除细菌和有害物质以免对人体带来不良影响。
[0003]以往，作为制造去除细菌和有害物质的蚯蚓干燥粉末的方法，已知有如下方法:通过从蚯蚓体内去除蚯蚓体内的粪土及含有有害物质的体腔液而从蚯蚓中去除细菌和有害物质，并将该蚯蚓作为蚯蚓干燥粉末的原料。例如，已知有如下方法:通过在明亮处长时间放置蚯蚓的活体的工序及将柠檬酸等酸的粉末撒在蚯蚓上或在该酸的水溶液中浸泡蚯蚓的工序，而从蚯蚓体内去除粪土、体腔液，随后粉碎蚯蚓，冷冻干燥其粉碎物，由此制造去除细菌和有害物质的蚯蚓干燥粉末(参考专利文献I)。
[0004]并且，还已知有通过对制造出的蚯蚓干燥粉末进行加热杀菌来进一步去除细菌的方法(参考专利文献2)。
[0005]专利文献1:日本专利第4808822号公报
[0006]专利文献2:日本专利第4886017号公报
[0007]作为保健食品和药剂的蚯蚓干燥粉末的药理作用基于蚯蚓的酶的作用，蚯蚓干燥粉末的酶活性越高其药理作用越高，因此对所制造的蚯蚓干燥粉末要求较高的酶活性。
[0008]但是，若如以往进行加热杀菌，则由于酶一般不耐热，因此不可避免地造成酶活性下降。


【发明内容】

[0009]鉴于该情况，本发明的主要课题在于通过采用合理的杀菌处理方法来提供一种不仅没有蚯蚓的酶活性下降之虞，而且可以使所得到的蚯蚓干燥粉末的酶活性增大的蚯蚓干燥粉末的制造方法。
[0010]本发明的第I特征方案涉及一种蚯蚓干燥粉末制造方法，其特征在于，该方法是将经粪土去除处理的蚯蚓作为原料制造蚯蚓干燥粉末的方法，其中，
[0011]对经粪土去除处理的蚯蚓的活体或其粉碎物进行在10?500MPa的压力条件且O?70°C的温度条件下的加压处理，并将该加压处理后的蚯蚓或其粉碎物作为所述蚯蚓干燥粉末的原料。
[0012]S卩，根据本方案，能够通过加压处理来对经粪土去除处理的蚯蚓或其粉碎物进行更可靠的杀菌，因此不同于存在酶活性下降之虞的加热杀菌，没有酶活性下降之虞，不仅如此，还能够通过加压处理使蚯蚓或其粉碎物的酶活性增大。
[0013]并且，通过基于加压处理的蚯蚓酶活性的增大而促进蚯蚓的自身消化(日文:自己消化)，由此蚯蚓的表皮在加压处理期间通过自身消化而溶解，因此能够省去以往在加工成蚯蚓干燥粉末之前必须进行的通过过滤等去除蚯蚓表皮的工序，随之，还能够避免由过滤等表皮去除工序而引起的有效成分的损失和提取蚯蚓干燥粉末的上清液的收率下降等问题。
[0014]另外，通过加压处理也能够有效地降低在从蚯蚓的粉碎等工序至加工成干燥粉末的过程中产生的蚯蚓的臭气，还能够优化工作环境。而且，由于在上述温度条件下进行所述加压处理，因此能够在酶活性不会因加热而下降的温度条件下更加有效地进行蚯蚓的杀菌。此外，加压处理的压力条件更优选为100?200MPa。
[0015]本发明的第2特征方案为适于实施第I特征方案的方案，其特征在于，
[0016]作为所述粪土去除处理进行如下处理:通过对蚯蚓进行基于加热器的热线照射而从蚯蚓的体内去除粪土，并对该粪土去除后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
[0017]S卩，蚯蚓有以下习性:当表皮变得干燥时，为了使身体免受干燥的影响而从体内排泄粪土等。针对于此，根据上述方案，能够使蚯蚓的表皮因基于加热器的热线照射而变得干燥，从而促进蚯蚓排出粪土，另外，随着加热器的照射，蚯蚓的体温上升，由此运动变活跃而能够进一步提高粪土排出效率。由此，能够在极短时间内有效地从蚯蚓的体内去除粪土。
[0018]S卩，根据本方案，能够如此在短时间内去除粪土，因此在去除粪土时能够减小对蚯蚓的损伤，由此能够有效地抑制伴随对蚯蚓的损伤的酶活性下降。
[0019]本发明的第3特征方案为适于实施第2特征方案的方案，其特征在于，
[0020]交替进行如下处理:对蚯蚓进行所述基于加热器的热线照射；及通过该热线照射去除蚯蚓排泄的粪土，或者去除培育蚯蚓的培育床的表层床材。
[0021]S卩，通过基于加热器的热线照射，蚯蚓将自己排泄的粪土缠在身上，或者钻进培育蚯蚓的培育床的床材，由此基于加热器的热线照射受到粪土或表层床材的妨碍。针对于此，根据上述方案，对蚯蚓交替进行基于加热器的热线照射；及去除缠在蚯蚓上的粪土，或去除钻进的蚯蚓上方表层床材，因此基于加热器的热线照射不会受到粪土或表层床材的妨碍，从而能够更加有效地从蚯蚓的体内去除粪土。
[0022]S卩，根据本方案，能够如此更加有效地去除粪土，因此在去除粪土时能够减小对蚯蚓的损伤，由此能够更加有效地抑制伴随对蚯蚓的损伤的酶活性下降。
[0023]本发明的第4特征方案为适于实施第I?第3特征方案的方案，其特征在于，
[0024]作为所述粪土去除处理进行如下处理:通过将蚯蚓暴露在气化的挥发性有机溶剂中而从蚯蚓的体内去除粪土及体腔液，并对该粪土及体腔液去除后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
[0025]即，根据上述方案，通过将使用挥发性有机溶剂进行了粪土、体腔液的去除处理的蚯蚓作为蚯蚓干燥粉末的原料，与将未进行该处理的蚯蚓作为原料的方法相比，能够得到酶活性(即药理作用)较高的蚯蚓干燥粉末。
[0026]并且，根据上述方案，通过与柠檬酸等酸相比对蚯蚓的伤害较少的挥发性有机溶剂对蚯蚓赋予刺激，由此还能够从蚯蚓的体内安全地去除粪土及体腔液。
[0027]另外，根据该方案，使挥发性有机溶剂气化并使蚯蚓暴露在其中，因此与使其浸溃在液体挥发性有机溶剂中的情况相比，不会使蚯蚓的体温大幅下降，因此，不会因蚯蚓的体温下降而招致蚯蚓的粪土、体腔液的排出效率下降，还能够有效地从蚯蚓的体内去除粪土及体腔液。
[0028]此外，若在挥发性有机溶剂中选用具有杀菌作用的溶剂，则能够通过本方案进行粪土、体腔液的去除处理，同时还能够进行蚯蚓的杀菌。
[0029]本发明的第5特征方案为适于实施第I?第3特征方案的方案，其特征在于，
[0030]作为所述粪土去除处理进行如下处理:通过将蚯蚓浸溃在碱性溶液中而从蚯蚓的体内去除粪土及体腔液，并对该粪土及体腔液去除后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
[0031]S卩，根据上述方案，通过将使用碱性溶液进行了粪土、体腔液的去除处理的蚯蚓作为蚯蚓干燥粉末的原料，与将未进行该处理的蚯蚓作为原料的方法相比，能够得到酶活性(即药理作用)较高的蚯蚓干燥粉末。
[0032]并且，通过与柠檬酸等酸相比对蚯蚓的伤害较少的碱性溶液对蚯蚓赋予刺激，由此还能够从蚯蚓的体内安全地去除粪土及体腔液。
[0033]此外，若在碱性溶液中选用具有杀菌作用的溶液，则能够通过本方案进行粪土、体腔液的去除处理，同时还能够进行蚯蚓的杀菌。

【专利附图】

【附图说明】
[0034]图1是表示在培育专用床上培育的蚯蚓的一般细菌数量及大肠杆菌数量的表。
[0035]图2是表示通过气化的挥发性有机溶剂的暴露来进行粪土、体腔液去除处理的蚯蚓的酶活性变化的表。
[0036]图3是表示通过浸溃在碱性溶液中来进行粪土、体腔液去除处理的蚯蚓的酶活性变化的表。
[0037]图4是表示由加压处理引起的蚯蚓的一般细菌数量及大肠杆菌数量变化的表。
[0038]图5是表示由加压处理引起的蚯蚓的酶活性变化的表。

【具体实施方式】
[0039]本发明的蚯蚓干燥粉末的制造方法分为蚯蚓的养殖工序、蚯蚓的粪土去除处理工序、蚯蚓干燥粉末的制造工序，以下分别对此进行说明。此外，在本例中，蚯蚓使用属于正蚓(Lumbricidae)科的赤子爱胜虫引。
[0040]<蚯蚓的养殖工序>
[0041]在本发明中，将蚯蚓区分为产卵的繁殖用蚯蚓和作为蚯蚓干燥粉末原料的培育用蚯蚓来进行培育。而且，在繁殖专用床上饲养繁殖用蚯蚓并使其产卵，并且在培育专用床上饲养培育用蚯蚓来进行蚯蚓的养殖。
[0042]繁殖专用床是将床材铺在容器内来制作的，该床材并没有特别限定，可以与以往的蚯蚓养殖同样地由泥土构成。
[0043]并且，培育专用床是将植物性纤维材料作为床材并将其铺在容器内来制作的。此夕卜，作为植物性纤维材料能够采用椰子、菠萝、椰子果、泥炭藓、花生壳、废纸浆等各种纤维材料。
[0044]在制造将该植物性纤维材料作为床材的培育专用床时，首先，粉碎植物性纤维材料，随后，使其含有维生素和钙等矿物质成分，并将粉碎物浸溃在调整为适于蚯蚓的生育环境的中性程度pH值的处理液中，由此使其含有矿物质成分，同时进行粉碎物的pH调整。而且，干燥该粉碎物来调整含水量，并由最终得到的干燥物制造培育专用床。
[0045]作为培育专用床原料的植物性纤维材料的细菌少于泥土。而且，通过将植物性纤维材料的粉碎物浸溃在上述处理液中的工序，使粉碎物中的砷和重金属在处理液中溶出，由此作为粉碎物的植物性纤维材料成为砷和重金属等有害物质被分离去除的纤维材料。而且，由于将该细菌较少且有害物质被去除的植物性纤维材料作为原料，因此培育专用床中的细菌、有害物质少。因此，能够通过该培育专用床在清洁的环境中饲养培育用蚯蚓。
[0046]在本发明中的蚯蚓的养殖工序中，在繁殖专用床上对繁殖用蚯蚓另行供给饵料进行饲养，使其产卵，并将繁殖用蚯蚓产的卵移到培育专用床，在培育专用床上使其孵化，或者，将在繁殖专用床上孵化的蚯蚓移到培育专用床。而且，将培育专用床上的蚯蚓作为培育用蚯蚓，以不另行供给饵料的方式进行饲养。
[0047]产卵时需要钙、蛋白质和有机分解物等养分，因此对于繁殖专用床上的繁殖用蚯蚓的饲养而言，为了供给这种养分使其有效地产卵而在供给饵料的同时进行。此外，作为饵料，能够采用烧酒的渣滓、磨碎的咖啡豆、蘑菇的废菌床等各种饵料。
[0048]并且，在培育专用床上的培育用蚯蚓的饲养中，培育专用床将细菌少且有害物质被分离去除的植物性纤维材料作为原料，因此能够有效地抑制细菌和有害物质积蓄在培育用蚯蚓的体内。
[0049]S卩，一般在繁殖着细菌且还包含不少砷和重金属等有害物质的泥土中培育蚯蚓时，蚯蚓在其培育中吞食泥土而在体内逐渐积蓄细菌和有害物质。相对于此，在培育专用床上对培育用蚯蚓进行培育时，培育用蚯蚓将作为培育专用床的床材的植物性纤维材料作为饵料来吞食，由于该植物性纤维材料中细菌少且有害物质被分离去除，因此能够有效地抑制细菌和有害物质积蓄在培育用蚯蚓的体内。
[0050]并且，培育用蚯蚓并不以产卵为目的，因此可以不供给产卵所需的养分，另外，培育用蚯蚓通过吞食植物性纤维材料就可以充分生长，因此在培育专用床上的培育用蚯蚓的培育中，与繁殖用蚯蚓不同，以不另行供给饵料的方式进行。由此，避免包含于饵料中的不少的砷和重金属等有害物质经由饵料积蓄在蚯蚓中；以及避免通过饵料促进植物性纤维材料的细菌繁殖，从而能够更加有效地抑制细菌和有害物质积蓄在培育用蚯蚓的体内。
[0051]此外，培育用蚯蚓所吞食的植物性纤维材料中通过上述处理液浸溃工序而含有作为营养成分的矿物质成分，因此能够避免培育用蚯蚓因营养不足而生长不良等问题。
[0052]图1表示通过本工序得到的在培育专用床上以20_25°C饲养3个月的蚯蚓的一般细菌数量及大肠杆菌数量。本例中的培育专用床将椰子纤维作为原料。具体而言，培育专用床以如下方法制作:利用市售的粉碎机粉碎椰子纤维，并利用通过灭菌用过滤器的自来水充分清洗而去除所附着的污垢，接着，在使其含有维生素和钙等矿物质成分而调整为中性程度的PH值的处理液中将椰子纤维的粉碎物浸溃约20小时，从而使其含有矿物质成分，同时进行粉碎物的PH调整，随后，将该粉碎物以20-40°C长时间低温干燥而成的材料铺在容器中，由此制作培育专用床。此外，在图1中，对在由泥土构成的养殖床上另行供给饵料进行饲养的以往方法的蚯蚓的一般细菌数量及大肠杆菌数量进行比较。对于通过本工序得到的蚯蚓和以往方法的蚯蚓，分别取5只，利用均质器对每只进行粉碎，不追加进行杀菌工序而进行细菌数量检查。
[0053]细菌数量检查中，一般细菌数量检查通过如下进行:将蚯蚓粉碎溶液的原液和利用灭菌水稀释的艇蝴粉碎溶液ImL涂布于3M Petrifilm AC板(Sumitomo 3M Limited制造，3M及Petrifilm为注册商标)上，在设定为30°C的恒温箱中将该板培养48小时之后，测量菌落数。大肠杆菌数量检查通过如下进行:将蚯蚓粉碎溶液的原液和利用灭菌水稀释的虫丘虫引粉碎溶液ImL涂布于3M Petrifilm RCC板(Sumitomo 3M Limited制造)上,在设定为35°C的恒温箱中将该板培养24小时之后，测量菌落数。
[0054]如图1所示，以往方法的蚯蚓中，均无法测定一般细菌及大肠杆菌。这是因为无法测量10亿以上的细菌数量，S卩，表示以往方法的蚯蚓中积蓄着大量细菌。相对于此，在培育专用床上饲养的通过本工序得到的蚯蚓中，一般细菌及大肠杆菌均落在可测定范围内，即，与以往方法的蚯蚓相比，通过本工序能够有效地抑制细菌积蓄在体内。尤其是关于大肠杆菌，若考虑以往方法的蚯蚓至少为10亿以上的值，则可得知其数量减少6位以上。如此，与以往方法的蚯蚓相比，在培育专用床上饲养的通过本工序得到的蚯蚓能够有效地抑制细菌积蓄在体内。
[0055]<蚯蚓的粪土去除处理工序>
[0056]该蚯蚓的粪土去除处理工序分为:(I)通过加热器的照射而进行的粪土去除工序、随后的(2-1)通过露在气化挥发性有机溶剂中而进行的残留粪土、体腔液去除工序、或(2-2)通过浸溃在碱性溶液中而进行的残留粪土、体腔液去除工序。
[0057](I)通过加热器的照射而进行的粪土去除工序
[0058]在本工序中，利用当表皮变得干燥时为了使身体免受干燥的影响而排泄粪土等并将粪土缠在身上的这种蚯蚓的习性，通过基于加热器的热线照射使蚯蚓的表皮干燥，从而促进蚯蚓的粪土排出。而且，随着加热器的照射，蚯蚓的体温上升，由此运动变活跃而进一步提高粪土排出效率，从而能够有效地进行培育用蚯蚓的粪土去除。
[0059]作为具体的工序，首先，将培育用蚯蚓饲养一定期间的培育专用床移动到处理室，随后，对在培育专用床上露在明亮环境中的培育用蚯蚓(换言之，在明亮环境中出现在培育专用床表面的培育用蚯蚓)，从上方进行基于红外线加热器等加热器的热线照射。
[0060]若如此，则由于培育用蚯蚓讨厌基于加热器的热线照射，在排泄粪土的同时钻进床材中，因此暂时停止加热器的照射，从培育专用床剥离床材，直至培育用蚯蚓被露在培育专用床的表面(出现在表面)上，随后，再次对露在培育专用床的表面上的培育用蚯蚓从上方进行加热器的照射。
[0061]通过交替反复进行该加热器的照射和床材的剥离，能够直接对培育用蚯蚓进行加热器的照射，由此能够使其有效地排泄粪土，同时，能够使培育用蚯蚓逐渐钻进培育专用床下方。而且，反复进行该操作，直至成为床材从培育专用床上几乎消失且培育用蚯蚓聚集在培育专用床的底部的状态。
[0062]而且，若在培育用蚯蚓聚集在该培育专用床的底部的状态下仍进行加热器的照射，则没有可钻进的床材，因此培育用蚯蚓将排泄的粪土缠在身上，防止加热器的照射。因此，暂时停止加热器的照射，从培育用蚯蚓上剥离粪土，再次对培育用蚯蚓从上方进行加热器的照射。
[0063]通过将该加热器的照射和粪土的剥离反复交替进行2?3次，由此可以有效地从培育用蚯蚓的体内去除粪土。
[0064]如此，在本工序中，仅剥离培育用蚯蚓所钻进部分的床材，或者剥离缠在培育用蚯蚓上的粪土，随后，对培育用蚯蚓进行基于加热器的热线照射，由此基于加热器的热线照射不会受到床材或粪土的妨碍，即可以有效地从培育用蚯蚓的体内去除粪土。
[0065]并且，在本工序中，从培育专用床取出培育用蚯蚓，无需费时费力区分培育用蚯蚓和床材，就能够通过加热器的照射而从培育用蚯蚓去除粪土，同时，能够区分培育用蚯蚓和床材，因此作为省时省力的处理是有效的。
[0066]此外，蚯蚓若体温上升某一程度则会死亡，因此在本工序中，为了防止培育用蚯蚓的体温过度上升，将通过加热器照射的热量限制在蚯蚓不会死亡的程度，并且，间歇地使用加热器而不是长时间连续使用。
[0067](2-1)通过暴露在气化挥发性有机溶剂中而进行的残留粪土、体腔液去除工序
[0068]本工序如下进行:使清洗通过加热器的照射而进行了粪土去除工序后的表皮的培育用蚯蚓暴露在气化的挥发性有机溶剂中而对培育用蚯蚓赋予刺激，由此从培育用蚯蚓中去除残留粪土及体腔液。
[0069]由于体腔液中包含蚯蚓体内的砷和重金属等有害物质，因此通过去除体腔液,能够从培育用蚯蚓的体内去除有害物质。
[0070]暴露在气化的挥发性有机溶剂中是通过如下进行:例如，将包含挥发性有机溶剂的脱脂棉放入瓶中，使挥发性有机溶剂在瓶内气化，并通过安装于瓶上的喷嘴等喷射机构，向培育用蚯蚓喷吹出该气化的挥发性有机溶剂。
[0071]如此使挥发性有机溶剂气化并使蚯蚓暴露在其中，由此与浸溃在液体挥发性有机溶剂中的情况相比，不会使蚯蚓的体温大幅下降，因此不会招致由蚯蚓的体温下降引起的蚯蚓的粪土、体腔液的排出效率下降。
[0072]并且，通过将使用挥发性有机溶剂进行了粪土、体腔液的去除处理的蚯蚓作为蚯蚓干燥粉末的原料，与将未进行该处理的蚯蚓作为原料的方法相比，能够得到酶活性(即药理作用)较高的蚯蚓干燥粉末。
[0073]在本工序中使用的挥发性有机溶剂没有特别限定，可以为乙醇、甲醇、己烷、三乙胺、乙酸甲酯、氯仿等任意溶剂，但从毒性和安全性方面考虑，特别优选乙醇。
[0074]并且，若使用乙醇作为挥发性有机溶剂，则能够去除残留粪土、体腔液，同时还能够进行蚯蚓表面的杀菌。
[0075]图2表示通过本工序去除粪土、体腔液的培育用蚯蚓的酶活性变化。具体而言，首先，对在培育专用床上饲养的培育用蚯蚓，与(I)的工序同样地通过加热器的照射而去除粪土，在(2-1)的残留粪土、体腔液去除工序中，使用乙醇作为挥发性有机溶剂，将培育用蚯蚓暴露在于50°C下气化的乙醇中而去除残留粪土、体腔液。而且，随后利用均质器粉碎培育用蚯蚓，利用纯水使其粉碎物悬浮，测定通过离心分离机从该悬浮液中抽取的上清液的活性。此外，为了求出比活性，还测定蛋白质量。并且，作为比较对象，还测定从未进行气化乙醇的暴露处理的蚯蚓中抽取的上清液的活性。
[0076]在酶活性的测定中，使用纤溶酶基质(S-2251:SEKISUI MEDICAL C0., LTD.制造)，t_PA(tissue plasminogen activator)基质(S-2288:SEKISUI MEDICAL C0., LTD.制造)作为纤溶活性基质，测定纤溶酶活性、t-PA活性。将在I分钟内Ιμπιο?的ρΝΑ(对硝基苯胺)游离的量作为 I 单位，使用 CORONA GRATING MICROPLATE READER SH-9000 (CORONAELECTRIC C0.，LTD.制造)在37°C下测定405nm的吸收波长。反应溶液组成为0.25mM基质、50mM Tris-HCl、适量的酶液。
[0077]通过Bradford法测定蛋白质量。具体而言，使用B1-Rad公司的B1-Radprotein assay 试剂，使用 CORONA GRATING MICROPLATE READER SH-9000 (CORONA ELECTRICC0., LTD.制造)在波长595nm下定量。在制作检量线时，使用牛血清白蛋白(BSA)。
[0078]如图2所示，与未进行气化乙醇的暴露处理的蚯蚓相比，暴露在气化乙醇中的蚯蚓的纤溶酶活性、t-PA活性的总活性略低于2倍，比活性均能够提高至2倍以上。如此，本发明中通过气化挥发性有机溶剂的暴露而进行残留粪土、体腔液去除工序，由此不仅能够去除残留粪土、体腔液，还能够提高培育用蚯蚓的酶活性。
[0079](2-2)通过浸溃在碱性溶液中而进行的残留粪土、体腔液去除工序
[0080]本工序如下进行:将通过加热器的照射进行了粪土去除工序后的表皮清洗后的培育用蚯蚓浸溃在碱性溶液中，来对培育用蚯蚓赋予刺激，由此从培育用蚯蚓中去除残留粪土及体腔液。
[0081]并且，将使用碱性溶液进行粪土、体腔液的去除处理的蚯蚓作为蚯蚓干燥粉末的原料，由此与将未进行该处理的蚯蚓作为原料的方法相比，能够得到酶活性(即药理作用)高的蚯蚓干燥粉末。
[0082]在本工序中使用的碱性溶液的溶质没有特别限定，可以为次氯酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、磷酸氢二钠、乙酸钠、柠檬酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钙等任意溶质，但特别优选次氯酸钠。这是因为，次氯酸钠作为食品添加物已被认可，且安全性较高，其溶液的体腔液去除效果较高，具有较强的杀菌作用。
[0083]图3表示通过本工序去除粪土、体腔液的培育用蚯蚓的酶活性变化。具体而言，首先，对在培育专用床上饲养的培育用蚯蚓，与(I)的工序同样地通过加热器的照射而去除粪土，在(2-1)的残留粪土、体腔液去除工序中，使用次氯酸钠(NaClO)及氯化钠(NaCl)作为碱性溶液的溶质，在调整为0.05%,0.1%,0.25%或0.5%的次氯酸钠溶液或调整为10%的氯化钠溶液中将培育用蚯蚓浸溃10分钟，去除残留粪土、体腔液。而且，在利用纯水清洗该培育用蚯蚓之后，利用均质器粉碎浸溃在各溶液中的培育用蚯蚓，并利用纯水使该粉碎物悬浮，测定通过离心分离机从该悬浮液中抽取的上清液的活性。此外，为了求出比活性，还测定蛋白质量。并且，作为比较对象，还测定从未进行溶液浸溃处理的蚯蚓中抽取的上清液的活性。
[0084]与图2中的测定同样地进行酶活性测定及蛋白质量测定。
[0085]如图3所示，与未进行溶液浸溃处理的蚯蚓相比，浸溃在各溶液中的蚯蚓的纤溶酶活性、t-PA活性的总活性、比活性均能够得到提高。而且，与氯化钠溶液相比，次氯酸钠溶液即使在极低的浓度下也能够提高酶活性，即使在0.1 %浓度的次氯酸钠溶液中也存在与10%氯化钠溶液相同程度的酶活性的提高效果。如此，本发明中通过浸溃在碱性溶液中而进行残留粪土、体腔液去除工序，由此不仅能够去除残留粪土、体腔液，还能够提高培育用蚯蚓的酶活性。
[0086]<蚯蚓干燥粉末的制造工序>
[0087]在本工序中，首先，利用均质器等公知机构粉碎通过蚯蚓的粪土去除处理工序去除粪土、体腔液的培育用蚯蚓，并利用纯水使其粉碎物悬浮。随后，将该悬浮液放入薄膜等容器中，通过适当的加压装置进行加压处理，对悬浮液进行杀菌。而且，通过离心分离机从加压处理后的悬浮液中抽取上清液，对该上清液实施冷冻干燥处理，从而制造蚯蚓干燥粉末。
[0088]在制造蚯蚓干燥粉末时，不仅去除蚯蚓的粪土、体腔液，还对蚯蚓进行杀菌处理，由此能够得到进一步对人体无害的蚯蚓干燥粉末。因此，在本工序中，通过加压处理对培育用蚯蚓实施杀菌处理。
[0089]作为杀菌处理已知有加热处理，但加热处理存在酶活性因该加热而下降之虞。相对于此，在通过该加压处理进行的杀菌中，无需进行如酶活性下降的加热就能够可靠地杀菌，进而通过加压处理能够使酶活性增大。
[0090]并且，通过基于加压处理的酶活性增大而促进蚯蚓的自身消化，由此，蚯蚓的表皮在加压处理期间通过自身消化而溶解。因此，通过进行加压处理，能够省去原本需进行的通过过滤等的蚯蚓表皮的去除工序。以往，存在随着表皮的去除而有效成分损失及进行干燥而成为蚯蚓干燥粉末的上清液的收率下降之虞，但通过采用加压处理，能够避免该问题。
[0091]另外，还存在通过该加压处理还能够降低从蚯蚓的粉碎至加工成干燥粉末时产生的蚯蚓臭气的优点。
[0092]在本工序中的加压处理中，其压力条件优选为10?500MPa，更优选为100?200MPa，并且，加压时间优选为0.5?48小时，更优选为I?2小时。
[0093]并且，温度条件没有特别限定，优选为O?70°C，更优选为40?50°C，通过在该温度条件下进行加压处理，能够更加有效地进行杀菌。此外，若为该温度，则也不会有酶活性降低的情况。
[0094]并且，在本工序中，也可以代替培育用蚯蚓的粉碎物的悬浮液，将培育用蚯蚓的活体与纯水一同封入薄膜中进行加压处理。在这种情况下，也可以得到与在培育用蚯蚓的粉碎物的悬浮液中进行加压处理相同的效果。而且，在加压处理后，粉碎表皮溶解的培育用蚯蚓，使用与培育用蚯蚓一同封入薄膜中的纯水得到粉碎物的悬浮液等即可。
[0095]图4、5表示本工序中进行加压处理时的培育用蚯蚓的细菌数量的变化及酶活性变化。进行测定的蚯蚓为去除粪土、体腔液的培育用蚯蚓，在去除粪土、体腔液之后利用纯水进行清洗，接着使用均质器粉碎，并使粉碎物悬浮在纯水中。而且，随后将35ml的悬浮液封入塑料薄膜的容器中，在100MPa、50°C下处理I?2小时，并测定通过离心分离机从该加压处理后的悬浮液中抽取的上清液的活性及细菌数量。并且，作为比较对象，还测定从未进行加压处理的蚯蚓中抽取的上清液的活性及细菌数量。
[0096]细菌数量检查中，一般细菌数量检查通过如下进行:将利用灭菌水稀释的蚯蚓粉碎溶液ImL涂布于3M Petrifilm AC板(Sumitomo 3M Limited制造)上，在设定为30°C的恒温箱中将该板培养48小时之后，测量菌落数。大肠杆菌数量检查通过如下进行:将利用灭菌水稀释的Φ丘蝴粉碎溶液ImL涂布于3M Petrifilm RCC板(Sumitomo 3M Limited制造)上，在设定为35°C的恒温箱中将该板件培养24小时之后，测量菌落数。
[0097]与图2中的测定同样地进行酶活性测定及蛋白质量测定。
[0098]如图4所示，在未进行加压处理的情况下检测出大量一般细菌及大肠杆菌，但在进行I小时加压处理的情况下，一般细菌数量变得极少，关于大肠杆菌数量为阴性。另外，在进行2小时加压处理的情况下，一般细菌数量及大肠杆菌数量均为阴性。如此，通过进行加压处理，能够有效地进行杀菌。
[0099]如图5所示，若进行加压处理则蛋白质沉淀，因此蛋白质浓度减少，但纤溶酶活性、t-PA活性的总活性增高，比活性也增高。如此通过进行加压处理，不仅能够杀菌，还能够提高酶活性。
[0100][另一实施方式]
[0101]在前述实施方式中，在制造蚯蚓干燥粉末时，蚯蚓使用赤子爱胜蚓，但本发明并不限定于此，可以使用例如红蚯蚓等以保健食品用、药剂用途使用的各种蚯蚓。
[0102]在前述实施方式中的蚯蚓的养殖工序中，在制造用于饲养培育用蚯蚓的培育专用床时，将作为床材的植物性纤维材料的粉碎物的pH值调整为中性程度，但本发明并不限定于此，粉碎物的pH值可以根据目的调整为各种值。
[0103]在前述实施方式中的蚯蚓的养殖工序中，在制造用于饲养培育用蚯蚓的培育专用床时，示出了对于作为床材的植物性纤维材料的粉碎物，使其含有矿物质成分并且进行pH调整的情况，但本发明并不限定于此，也可以不使植物性纤维材料的粉碎物含有矿物质成分并且不进行PH调整。并且，床材既可以不用粉碎，也可以不利用减菌水清洗。
[0104]在前述实施方式中通过加热器的照射进行的粪土去除工序中，示出了无需从培育专用床取出培育用蚯蚓即可从培育专用床的上方对培育用蚯蚓进行加热器的照射的情况，但本发明并不限定于此，也可以从培育专用床取出培育用蚯蚓并对该培育用蚯蚓进行加热器的照射。
[0105]在前述实施方式中通过暴露在气化挥发性有机溶剂中而进行的残留粪土、体腔液去除工序中，作为气化机构，将包含挥发性有机溶剂的脱脂棉放入瓶中，并使挥发性有机溶剂在瓶内气化的情况，但本发明并不限定于此，可以使用另一种气化机构。
[0106]在前述实施方式中，作为残留粪土、体腔液去除工序，示出了将培育用蚯蚓浸溃在碱性溶液中的情况，但也可以在气化的碱性溶液中暴露培育用蚯蚓来去除残留粪土、体腔液。
[0107]在本发明的实施中，对培育用蚯蚓的加压处理的温度条件、时间条件、压力条件、其他条件能够采用各种条件。
[0108]在前述实施方式中，在蚯蚓的养殖工序中对在培育专用床上饲养的培育用蚯蚓通过加热器的照射而去除粪土、通过暴露在气化挥发性有机溶剂或通过浸溃在碱性溶液中而去除残留粪土、体腔液、以及通过加压处理进行杀菌处理来制造了蚯蚓干燥粉末，但本发明并不限定于此，也可以通过与前述实施方式不同的方法进行蚯蚓的养殖和粪土、体腔液去除处理，并通过加压处理对该蚯蚓进行杀菌处理来制造蚯蚓干燥粉末。
[0109]产业上的可利用性
[0110]本发明的蚯蚓干燥粉末制造方法能够用于制造在各种领域中用于各种用途的蚯蚓干燥粉末。
【权利要求】
1.一种蚯蚓干燥粉末制造方法，是将经粪土去除处理的蚯蚓作为原料制造蚯蚓干燥粉末的方法,其中，对经粪土去除处理的蚯蚓的活体或其粉碎物进行在10?500MPa的压力条件且O?70°C的温度条件下的加压处理，并将该加压处理后的蚯蚓或其粉碎物作为所述蚯蚓干燥粉末的原料。
2.根据权利要求1所述的蚯蚓干燥粉末制造方法，其中，作为所述粪土去除处理进行以下处理:通过对蚯蚓进行基于加热器的热线照射而从蚯蚓的体内去除粪土，并对该粪土去除处理后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
3.根据权利要求2所述的蚯蚓干燥粉末制造方法，其中，交替进行以下处理:对蚯蚓进行所述基于加热器的热线照射；及通过该热线照射去除蚯蚓排泄的粪土，或者去除培育蚯蚓的培育床的表层床材。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的蚯蚓干燥粉末制造方法，其中，作为所述粪土去除处理进行以下处理:通过将蚯蚓暴露在气化的挥发性有机溶剂中而从蚯蚓的体内去除粪土及体腔液，并对该粪土及体腔液去除处理后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的蚯蚓干燥粉末制造方法，其中，作为所述粪土去除处理进行以下处理:通过将蚯蚓浸溃在碱性溶液中而从蚯蚓的体内去除粪土及体腔液，并对该粪土及体腔液去除处理后的蚯蚓的活体或其粉碎物进行所述加压处理。
【文档编号】A61L2/02GK104224846SQ201410440464
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月1日 优先权日:2013年9月3日
【发明者】赤泽真一, 脇本真之介, 渡边俊则 申请人:脇制药株式会社, 独立行政法人国立高等专门学校机构