一种溪畔杜鹃的组培快繁方法与流程

本发明涉及溪畔杜鹃的繁殖，特别涉及一种溪畔杜鹃的组培快繁方法。

背景技术：

1、溪畔杜鹃(rhododendron rivulare hand.-mazz.)是杜鹃花科杜鹃花属常绿小乔木或灌木，高1～3m。叶呈卵状披针形或长圆状卵形，花冠呈漏斗形，淡白色具红色斑点，单株花期长达30d，单花序花朵数可达18朵。溪畔杜鹃树形优美，花期长，是集观花、观叶、观形于一体的园林绿化新树种，具有较高的园艺价值。作为很好的园林景观树种，溪畔杜鹃存在自然杂交结实率低，种子小，播种成活困难，且种子繁殖苗生长缓慢等问题，从播种到开花至少需要3～4年，有的甚至8年以上，此外，其扦插苗存在成活难，长势慢，病虫害较多的问题。

2、此外，溪畔杜鹃茎段外植体采自室外，密被短腺头毛，消毒较为困难，污染率较高。在选择外植体材料时，以带有侧芽的嫩茎段最多，但是幼嫩茎段受季节的限制。以种子为外植体时，外植体灭菌较容易，但后代存在分离现象，花蕾也受到季节的限制。以叶片为外植体虽然不受季节的限制，但密被腺头睫毛，灭菌比较困难。

技术实现思路

1、为了解决上述的技术问题，本发明的目的是以溪畔杜鹃茎段等外植体作为材料进行组培快繁研究，建立高效的栽培模式和管理技术，保留优良性状的同时，可有效解决现有的繁殖方法存在的受繁殖季节的影响大，繁殖速度慢的问题。

2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

3、一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

4、步骤1：截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒，制得无菌外植体；

5、步骤2：将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上，进行腋芽诱导培养，得到腋芽；

6、步骤3：将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养，继代培养后，各茎节处长出不定芽；

7、步骤4：将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养，得到无菌苗；

8、步骤5：将无菌苗转接入生根诱导培养基中培养后，进行炼苗移栽；

9、所述步骤2中的腋芽诱导培养基为wpm+zt(1.0～3.0)mg·l-1+naa(0.1～1.0)mg·l-1；

10、所述步骤3中的继代增殖培养基为wpm+zt(1.0～4.0)mg·l-1+ga3(0.0～1.0)mg·l-1+naa(0.05～0.50)mg·l-1；

11、所述步骤4中的壮苗培养基为wpm+zt(0.1～1.0)mg·l-1+naa(0.1～0.5)mg·l-1；

12、所述步骤5中的生根诱导培养基为wpm+蔗糖(15～25)g·l-1+naa(0.5～1.5)mg·l-1+iba(0.5～1.5)mg·l-1+ac(0.1～2.0)g·l-1。

13、优选的，所述步骤1中用浓度为2％次氯酸钠进行消毒，消毒时间为8-12min。

14、优选的，所述步骤2中的腋芽诱导培养周期为20d。

15、优选的，所述步骤3中的继代增殖培养周期为50d。

16、优选的，所述步骤4中的壮苗培养周期为50d。

17、优选的，所述步骤5中的生根诱导培养周期为60d。

18、优选的，所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为：将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗5～6d，将炼苗后的组培苗取出，洗净根系的培养基，移栽于消毒过的基质上，将溪畔杜鹃移栽至土壤中，浇透水一次，每周浇一次水，进行常规管理。

19、优选的，所述基质为泥炭土﹕珍珠岩﹕河沙按照质量2﹕1﹕1配比而成。

20、优选的，所述步骤1～5中，培养温度为23-27℃，光照为12h/d，光照强度为2000lx。

21、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

22、(1)本发明通过溪畔杜鹃进行消毒、基础培养、增殖培养和生根培养等一系列工序，能够快速的获得大量的溪畔杜鹃组培苗，在消毒过程中，选用合适浓度的次氯酸钠作为消毒剂，有利于吸收和防止褐化。

23、(2)本发明以wpm为基本培养基时，培养效果显著高于其它培养基，对于腋芽萌发时间影响达到显著水平，对于生根诱导的影响达到显著水平。向其中添加了合适浓度的细胞分裂素zt和生长素naa，细胞分裂素zt与生长素naa协同作用，使丛生芽增殖速度加快，缩短增殖时间。在溪畔杜鹃的增殖培养中，ga3搭配zt使用时，会有更好的增殖效果；在生根诱导中，适量的ac能促使瓶苗生根较多，生长迅速且繁茂。

24、(3)移栽时，基质中泥炭土﹕珍珠岩﹕河沙的比例为2﹕1﹕1，此时能够显著增加移栽成活率，泥炭土具有丰富的营养和良好的保水性；珍珠岩具有独特的毛细管作用，可提高基质的孔隙度，改善其通气、排水性，有利于氧气扩散；河沙颗粒较大,土壤中的空气含量较高,有利于植物的呼吸和生长。此外,河沙还可以增加土壤的稳定性,避免土壤流失。因此泥炭土、珍珠岩和河沙配合作用可以具有良好的生根效果，特别是显著促进根长的生长。

技术特征：

1.一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤1中用浓度为2％次氯酸钠进行消毒，消毒时间为8-12min。

3.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤2中的腋芽诱导培养周期为20d。

4.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤3中的继代增殖培养周期为50d。

5.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤4中的壮苗培养周期为50d。

6.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤5中的生根诱导培养周期为60d。

7.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为：将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗5～6d，将炼苗后的组培苗取出，洗净根系的培养基，移栽于消毒过的基质上，将溪畔杜鹃移栽至土壤中，浇透水一次，每周浇一次水，进行常规管理。

8.根据权利要求7所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述基质为泥炭土﹕珍珠岩﹕河沙按照质量(2-4)﹕(1-2)﹕(1-2)配比而成。

9.根据权利要求7所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述基质为泥炭土﹕珍珠岩﹕河沙按照质量2﹕1﹕1配比而成。

10.根据权利要求1所述的一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，其特征在于，所述步骤1～5中，培养温度为23-27℃，光照为12h/d，光照强度为2000lx。

技术总结
本发明公开了一种溪畔杜鹃的组培快繁方法，属于溪畔杜鹃的繁殖技术领域。本发明以截取新鲜的溪畔杜鹃茎段消毒、腋芽诱导、继代增殖培养及壮苗、炼苗移栽一系列步骤，有效解决了外植体难灭菌、易褐化的技术难题，保留优良性状的同时，可有效解决现有的繁殖方法存在的受繁殖季节的影响大，繁殖速度慢的问题。

技术研发人员：刘艳,廖菊阳,吴林世,王玲,易心钰,李巧云,陈婵,刘馨蕴,黄雅奇,张娟
受保护的技术使用者：湖南省植物园
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16