一种三核颗粒HPLC指纹图谱及其建立方法

本发明涉及指纹图谱检测建立方法，尤其是涉及一种三核颗粒hplc指纹图谱及其建立方法。

背景技术：

1、中药复方药效物质基础研究是中医药现代化研究的关键热点技术领域，也是决定中药安全性、有效性和质量控制性的基础。中药指纹图谱技术目前被认为是中药质量控制的有效手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材、中药提取物以及中药制剂质量的真实性、优良性和稳定性，“整体性”和“模糊性”为其显著特点。中药制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的并且能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别和含量测定等方法都不足以解决这一问题，因此需要建立中药指纹图谱，较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，对中药质量进行整体描述和评价。

2、专利cn114558090b公开了一种中药新制剂，由荔枝核、橘核、山楂核等12味中药组成，具有行气止痛，温肾化瘀功效，用于治疗良性前列腺增生，疗效显著，在本专利将其称为三核颗粒，三核颗粒组方中共有多种中药药材，必须对它的物质群整体予以控制，建立三核颗粒指纹图谱可从整体上有效的表征其质量。因此，构建三核颗粒hplc指纹图谱检测方法势在必行。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种三核颗粒hplc指纹图谱及其建立方法，能有效的表征三核颗粒的质量，有利于全面监控药物的质量，且本发明的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点。

2、为实现上述目的，本发明提供了一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

3、步骤1、制备三核颗粒供试品溶液；

4、步骤2、制备混合对照品溶液；

5、步骤3、确定hplc色谱条件；

6、步骤4、建立hplc标准指纹图谱。

7、优选的，所述步骤1中制备三核颗粒供试品溶液的具体步骤为：取三核颗粒成品1g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，超声处理20-40分钟，滤过，取续滤液，即得三核颗粒供试品溶液。

8、优选的，所述步骤2中制备混合对照品溶液的具体步骤为：分别称取绿原酸0.96mg，甘草苷0.65mg、花旗松素1.34mg、盐酸小檗碱1.04mg、槲皮素0.21mg、朝藿定a0.31mg、朝藿定b0.32mg、朝藿定c0.30mg、淫羊藿苷1.45mg、甘草酸1.03mg、宝藿苷i0.23mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

9、优选的，所述步骤3中确定的hplc色谱条件为：色谱柱为gemininx-c18柱(4.6mm×250mm，5μm)；以乙腈为流动相a，以0.2％的磷酸溶液为流动相b，进行梯度洗脱；检测波长为270nm；柱温为30℃；流速为1.00ml/min；进样量为10μl。

10、优选的，所述步骤4中建立hplc标准指纹图谱的具体步骤为：吸取混合对照品溶液和三核颗粒供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，将供试品和混合对照品溶液的检测结果导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)》软件，经数据匹配，生成对照指纹图谱。

11、优选的，所述步骤1中超声处理的时间为30分钟。

12、优选的，所述梯度洗脱的方式为：以重量份数计，0min时，流动相a8％,流动相b92％；10min时，流动相a14％,流动相b86％；30min时，流动相a19％,流动相b81％；60min时，流动相a26％,流动相b74％；70min时，流动相a40％,流动相b60％；85min时，流动相a45％,流动相b55％；90min时，流动相a8％,流动相b92％；95min时，流动相a8％,流动相b92％。

13、本发明提供了一种依照上述三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法建立的三核颗粒hplc标准指纹图谱。

14、因此，本发明采用上述的一种三核颗粒hplc指纹图谱及其建立方法，能有效的表征三核颗粒的质量，有利于全面监控药物的质量，且本发明的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点。

15、下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

技术特征：

1.一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤1中制备三核颗粒供试品溶液的具体步骤为：取三核颗粒成品1g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，超声处理20-40分钟，滤过，取续滤液，即得三核颗粒供试品溶液。

3.根据权利要求2所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤2中制备混合对照品溶液的具体步骤为：分别称取绿原酸0.96mg，甘草苷0.65mg、花旗松素1.34mg、盐酸小檗碱1.04mg、槲皮素0.21mg、朝藿定a0.31mg、朝藿定b0.32mg、朝藿定c0.30mg、淫羊藿苷1.45mg、甘草酸1.03mg、宝藿苷i0.23mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

4.根据权利要求3所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤3中确定的hplc色谱条件为：色谱柱为gemininx-c18柱(4.6mm×250mm，5μm)；以乙腈为流动相a，以0.2％的磷酸溶液为流动相b，进行梯度洗脱；检测波长为270nm；柱温为30℃；流速为1.00ml/min；进样量为10μl。

5.根据权利要求4所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤4中建立hplc标准指纹图谱的具体步骤为：吸取混合对照品溶液和三核颗粒供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，将供试品和混合对照品溶液的检测结果导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)》软件，经数据匹配，生成对照指纹图谱。

6.根据权利要求5所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述步骤1中超声处理的时间为30分钟。

7.根据权利要求6所述的一种三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述梯度洗脱的方式为：以重量份数计，0min时，流动相a8％,流动相b92％；10min时，流动相a14％,流动相b86％；30min时，流动相a19％,流动相b81％；60min时，流动相a26％,流动相b74％；70min时，流动相a40％,流动相b60％；85min时，流动相a45％,流动相b55％；90min时，流动相a8％,流动相b92％；95min时，流动相a8％,流动相b92％。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的三核颗粒hplc指纹图谱的建立方法建立的三核颗粒hplc标准指纹图谱。

技术总结
本发明公开了一种三核颗粒HPLC指纹图谱及其建立方法，涉及指纹图谱检测建立方法技术领域。包括以下步骤：S1、制备三核颗粒供试品溶液；S2、制备混合对照品溶液；S3、确定HPLC色谱条件；S4、制备HPLC标准指纹图谱，本发明同时公开了由该方法得到的三核颗粒HPLC标准指纹图谱，所得指纹图谱有23个共有峰。本发明的三核颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，方法操作简便、稳定性高、重复性好，所得图谱分离度好、特征峰多，通过标准指纹图谱中共有峰的比较，可对三核颗粒的质量进行全面地评价和控制，有利于稳定产品质量，确保其内在质量的均一和稳定，确保临床用药的安全性和有效性。

技术研发人员：李慧峰,裴妙荣,孔祥鹏
受保护的技术使用者：山西中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16