本发明涉及病理学,特别涉及一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液及其制备方法和应用。
背景技术:
1、市面上的全自动免疫组化染色技术,脱蜡和修复过程分为两个阶段,第一阶段为使用探针逐片滴加环保型脱蜡液孵育,两遍以上脱蜡液孵育,孵育结束后再用酒精冲洗、缓冲液冲洗。第二阶段加入修复液充分覆盖切片组织加热孵育。该脱蜡修复模式主要存在以下问题:①脱蜡效果不佳:通用系统原理设计的全自动免疫组化染色仪使用该脱蜡修复模式很难适用于市面所有石蜡种类(如部分品牌石蜡杂质多、熔点稍高),或制片时水中杂质吸附到玻片上均会导致脱蜡液无法充分延展覆盖切片组织,组织局部脱蜡不佳。②耗时较长:全自动免疫组化染色仪的染色高效率和染色质量是科室选择使用全自动免疫组化染色仪代替手工染色的原因之一,而该脱蜡修复模式需两遍以上脱蜡液孵育、酒精冲洗、缓冲液冲洗、修复液修复,步骤繁琐,耗时较长,尤其针对大通量的全自动免疫组化染色仪,其染色效率下降;③针对通用系统原理设计的全自动免疫组化染色仪,该脱蜡修复模式易导致修复后排液时表面残留油膜再次吸附到玻片,后续不易清洗去除,从而导致染色不均匀。④酒精具有一定的腐蚀性,会导致酒精管道硬化,管道损坏率提高。因此,该脱蜡修复模式不仅降低了全自动免疫组化染色仪的效率,还从一定程度上会影响染色的质量。
2、鉴于此,急需优化该脱蜡修复模式繁琐的脱蜡及冲洗步骤,解决其存在的脱蜡不佳问题,提高染色效率及染色质量。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液及其制备方法和应用,该方法简化了脱蜡修复过程,在省略脱蜡液孵育、酒精冲洗、缓冲液冲洗步骤的情况下,保证脱蜡效果、缩短仪器运行时长、充分去除残留的石蜡和脱蜡液、减少油膜的吸附,不影响甚至更优于原先的染色结果。
2、本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的:
3、本申请的一个目的是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液,包括以下质量份组分:三乙醇胺0.8-1%,edta四钠0.1-0.3%,烷基糖苷1-3%,月桂酰胺基丙基甜菜碱2-4%,月桂酸钾1-3%,3-甲氧基-1-丙醇4-6%,月桂基醚1-3%,碳酸钠0.5-0.7%,补齐余量的纯水。
4、优选地,包括以下质量份组分:三乙醇胺0.9%,edta四钠0.2%,烷基糖苷2%,月桂酰胺基丙基甜菜碱3%,月桂酸钾2%,3-甲氧基-1-丙醇5%,月桂基醚2%,碳酸钠0.6%,补齐余量的纯水。
5、本申请的又一目的是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液的制备方法,包括以下步骤:
6、(1)按质量份称取三乙醇胺,溶于纯水中;
7、(2)按质量份称取edta四钠、烷基糖苷、月桂酰胺基丙基甜菜碱、月桂酸钾、3-甲氧基-1-丙醇、月桂基醚、碳酸钠,依次溶于步骤(1)的纯水中,搅拌均匀;
8、(3)全部成分添加完毕,补充余量的纯水,置于磁力搅拌器上,充分搅拌20min,得脱蜡补充液。
9、本申请的再一目的是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液在脱蜡和修复过程中的应用。
10、优选地,采用脱蜡补充液进行脱蜡修复的过程为:一遍脱蜡液孵育后,加入含脱蜡补充液成分的修复液进行脱蜡修复,具体为:按体积比2:5量取triton x-100以及脱蜡液补充液,加入修复液中,纯水定容后进行脱蜡修复。
11、本申请的另一目的是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液,所述修复液中包含脱蜡补充液。
12、优选地,所述修复液中还包括triton x-100,所述triton x-100与所述脱蜡补充液的体积比为2:5。
13、本申请的又一目的是提供一种脱蜡补充液的适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液的制备方法,包括以下步骤:
14、(1)按质量份称取三乙醇胺,溶于纯水中;
15、(2)按质量份称取edta四钠、烷基糖苷、月桂酰胺基丙基甜菜碱、月桂酸钾、3-甲氧基-1-丙醇、月桂基醚、碳酸钠,依次溶于步骤(1)的纯水中,搅拌均匀;
16、(3)全部成分添加完毕,补充余量的纯水,置于磁力搅拌器上,充分搅拌20min,得脱蜡补充液;
17、(4)按体积比2:5量取triton x-100以及步骤(3)配置完毕的脱蜡液补充液,加入修复液工作液中,纯水定容,得修复液。
18、本申请的再一目的是提供一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液在脱蜡修复过程中的应用。
19、优选地,采用修复液进行脱蜡修复的过程为:一遍脱蜡液孵育后,加入含脱蜡补充液成分的修复液进行脱蜡修复。
20、本发明上述技术方案,具有如下有益效果:
21、(1)本申请的配方针对通用系统全自动免疫组化染色仪的染色技术,在修复液中加入脱蜡补充液的成分,即在修复过程中同时引入浸泡式脱蜡清洗步骤,用以弥补原有的脱蜡、清洗不彻底,解决修复液中油膜较多的问题。
22、(2)本方法通过在修复过程中同时引入浸泡式脱蜡清洗的方式,简化前期脱蜡步骤程序,如省略重复脱蜡液孵育、酒精冲洗、缓冲液冲洗步骤,一定程度上缩短运行时间,提高用户的出片效率,改善脱蜡效果不佳,从而提高染色效果。
23、(3)本方法在修复液中添加了脱蜡补充液,该脱蜡补充液具有脱蜡、清洗功能的同时还有利于提高切片的亲水性,使得后续步骤的试剂延展性更佳,孵育更加充分,从一定程度上改善了染色效果,在不影响修复效果的同时,降低了染色不均的发生。
24、(4)本方法对比原先的步骤和成分更加环保,全过程无毒无酒精,避免了仪器管道长期被酒精损耗的风险,延长了仪器管道的使用寿命,避免了操作员长期接触酒精带来的危害,更有利于环境的保护。
1.一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液,其特征在于,包括以下质量份组分:三乙醇胺0.8-1%,edta四钠0.1-0.3%,烷基糖苷1-3%,月桂酰胺基丙基甜菜碱2-4%,月桂酸钾1-3%,3-甲氧基-1-丙醇4-6%,月桂基醚1-3%,碳酸钠0.5-0.7%,补齐余量的纯水。
2.根据权利要求1所述的适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液,其特征在于,包括以下质量份组分:三乙醇胺0.9%,edta四钠0.2%,烷基糖苷2%,月桂酰胺基丙基甜菜碱3%,月桂酸钾2%,3-甲氧基-1-丙醇5%,月桂基醚2%,碳酸钠0.6%,补齐余量的纯水。
3.根据权利要求1-2任一所述的适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的脱蜡补充液在脱蜡修复过程中的应用,其特征在于,所述脱蜡补充液是根据权利要求1-2任一所述的脱蜡补充液或根据权利要求3所述的制备方法制备得到的脱蜡补充液。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,采用脱蜡补充液进行脱蜡修复的过程为:一遍脱蜡液孵育后,加入含脱蜡补充液成分的修复液进行脱蜡修复,具体为:按体积比2:5量取triton x-100以及脱蜡液补充液,加入修复液中,纯水定容后进行脱蜡修复。
6.一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液,其特征在于,所述修复液中包含权利要求1-2任一所述的脱蜡补充液或包含权利要求3所述的制备方法制备得到的脱蜡补充液。
7.根据权利要求6所述的适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液,其特征在于,所述修复液中还包括triton x-100,所述triton x-100与所述脱蜡补充液的体积比为2:5。
8.根据权利要求6-7任一所述的脱蜡补充液的适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
9.一种适用于通用系统全自动免疫组化染色仪的修复液在脱蜡修复过程中的应用,其特征在于,所述修复液是根据权利要求6-7任一所述的修复液或根据权利要求7所述的制备方法制备得到的修复液。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,采用修复液进行脱蜡修复的过程为:一遍脱蜡液孵育后,加入含脱蜡补充液成分的修复液进行脱蜡修复。